植物磷酸二酯酶(PDE)ELISA試劑盒:原理、操作與應(yīng)用
發(fā)表時間:2024-10-29
植物磷酸二酯酶(PDE)ELISA試劑盒是一種基于酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)原理的生化檢測工具,專門用于定量檢測植物樣本中磷酸二酯酶(PDE)的含量。
其原理主要基于抗原與抗體的特異性結(jié)合。試劑盒中的微孔已預(yù)先包被有PDE捕獲抗體,加入樣本后,樣本中的PDE與捕獲抗體結(jié)合。隨后加入HRP(辣根過氧化物酶)標(biāo)記的檢測抗體,與PDE-捕獲抗體復(fù)合物結(jié)合。在加入底物TMB后,HRP催化TMB轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化為黃色。顏色的深淺與樣本中PDE的含量成正比。通過酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),可以計算出樣本中PDE的濃度。
操作方面,需要按照試劑盒說明書進(jìn)行,包括樣本處理、加樣、溫育、洗滌、顯色和讀數(shù)等步驟。應(yīng)用方面,該試劑盒可用于植物生理學(xué)、分子生物學(xué)等領(lǐng)域的研究,幫助研究人員了解植物在不同環(huán)境條件下的信號傳導(dǎo)機制,以及評估植物生長發(fā)育過程中的PDE活性變化。
其原理主要基于抗原與抗體的特異性結(jié)合。試劑盒中的微孔已預(yù)先包被有PDE捕獲抗體,加入樣本后,樣本中的PDE與捕獲抗體結(jié)合。隨后加入HRP(辣根過氧化物酶)標(biāo)記的檢測抗體,與PDE-捕獲抗體復(fù)合物結(jié)合。在加入底物TMB后,HRP催化TMB轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化為黃色。顏色的深淺與樣本中PDE的含量成正比。通過酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),可以計算出樣本中PDE的濃度。
操作方面,需要按照試劑盒說明書進(jìn)行,包括樣本處理、加樣、溫育、洗滌、顯色和讀數(shù)等步驟。應(yīng)用方面,該試劑盒可用于植物生理學(xué)、分子生物學(xué)等領(lǐng)域的研究,幫助研究人員了解植物在不同環(huán)境條件下的信號傳導(dǎo)機制,以及評估植物生長發(fā)育過程中的PDE活性變化。