人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)elisa檢測試劑盒
- 英文名稱:FAS/CD95 elisa試劑盒
- 品牌:越騰生物
- 產(chǎn)地:國產(chǎn)
- 型號:48T/96T
- 貨號:YT-H17210
- 價格: ¥1200/盒
- 發(fā)布日期: 2023-11-24
- 更新日期: 2024-12-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
保存條件 | 冷藏2-8°C |
品牌 | 越騰生物 |
貨號 | YT-H17210 |
用途 | 僅供科研使用,不得用于臨床診斷 |
檢測方法 | 雙抗體夾心法,競爭法 |
保質(zhì)期 | 6個月 |
適應(yīng)物種 | 人,大鼠,小鼠,猴,雞、羊等 |
檢測限 | 0.1 ng/ml |
數(shù)量 | 90 |
英文名稱 | FAS/CD95 elisa試劑盒 |
包裝規(guī)格 | 48T/96T |
標(biāo)記物 | HRP標(biāo)記 |
樣本 | 血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
應(yīng)用 | 科研實驗 |
是否進(jìn)口 | 否 |
人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)elisa檢測試劑盒
貨號:YT-H17210
英文簡稱:FAS/CD95 elisa試劑盒
定量檢測血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)elisa檢測試劑盒的濃度。
購買試劑盒,提供免費代測服務(wù)
操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
產(chǎn)品特點
一、、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細(xì)胞培養(yǎng)上清:4000rpm 條件下離心 20min,去除細(xì)胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。
2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,4000rpm 條件下離心 20min,小心地分離出血清,保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。
3、血漿:肝素,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下,離心 20 分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。樣本收集后,無法一次檢測完畢,請按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,使用時在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9 mL的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘,取上清檢測。
5、細(xì)胞提取液:貼壁細(xì)胞用冷的 PBS 輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 離心 5 分鐘后收集細(xì)胞;懸浮細(xì) 胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細(xì)胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復(fù)凍融使細(xì)胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘,取上清檢測。
6、其他生物體液:1000×g 離心 20 分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。
操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
技術(shù)提示:
1、混合蛋白溶液時,避免起泡。
2、加校準(zhǔn)品與樣本時,每個校準(zhǔn)品濃度和樣本都要更換移液槍頭,公共組分應(yīng)該懸臂加樣,避免交叉污染。
3、合適的溫育時間,和充分的洗滌步驟,是保證實驗結(jié)果準(zhǔn)確性的必要條件。
4、使用自動洗板機(jī)時,加入一個 30 秒浸泡的步驟,可以提高檢測精度。
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人轉(zhuǎn)鐵蛋白(TF)elisa試劑盒
人λ免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)elisa試劑盒
人TAU蛋白(TAU)elisa試劑盒
免責(zé)聲明 1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或小鼠體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。 2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。
貨號:YT-H17210
英文簡稱:FAS/CD95 elisa試劑盒
定量檢測血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)elisa檢測試劑盒的濃度。
購買試劑盒,提供免費代測服務(wù)
操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
產(chǎn)品特點
一、、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細(xì)胞培養(yǎng)上清:4000rpm 條件下離心 20min,去除細(xì)胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。
2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,4000rpm 條件下離心 20min,小心地分離出血清,保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。
3、血漿:肝素,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下,離心 20 分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。樣本收集后,無法一次檢測完畢,請按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,使用時在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9 mL的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘,取上清檢測。
5、細(xì)胞提取液:貼壁細(xì)胞用冷的 PBS 輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 離心 5 分鐘后收集細(xì)胞;懸浮細(xì) 胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細(xì)胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復(fù)凍融使細(xì)胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘,取上清檢測。
6、其他生物體液:1000×g 離心 20 分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。
操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
技術(shù)提示:
1、混合蛋白溶液時,避免起泡。
2、加校準(zhǔn)品與樣本時,每個校準(zhǔn)品濃度和樣本都要更換移液槍頭,公共組分應(yīng)該懸臂加樣,避免交叉污染。
3、合適的溫育時間,和充分的洗滌步驟,是保證實驗結(jié)果準(zhǔn)確性的必要條件。
4、使用自動洗板機(jī)時,加入一個 30 秒浸泡的步驟,可以提高檢測精度。
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