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人腫瘤壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)elisa檢測試劑盒
- 英文名稱：TL1A elisa試劑盒
- 品牌：越騰生物
- 產(chǎn)地：國產(chǎn)
- 型號：48T/96T
- 貨號：YT-H16982
- 價格： ￥1200/盒
- 發(fā)布日期： 2023-11-24
- 更新日期： 2024-12-18
產(chǎn)品詳請
| 產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
| 保存條件 | 冷藏2-8°C |
| 品牌 | 越騰生物 |
| 貨號 | YT-H16982 |
| 用途 | 僅供科研使用,不得用于臨床診斷 |
| 檢測方法 | 雙抗體夾心法,間接法 |
| 保質(zhì)期 | 180天 |
| 適應物種 | 人,大鼠,小鼠,猴,雞、羊等 |
| 檢測限 | 0.1 ng/ml |
| 數(shù)量 | 90 |
| 英文名稱 | TL1A elisa試劑盒 |
| 包裝規(guī)格 | 48T/96T |
| 標記物 | HRP標記 |
| 樣本 | 血清,血漿,細胞培養(yǎng)上清 |
| 應用 | 科研實驗 |
| 是否進口 | 否 |
人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)elisa檢測試劑盒
貨號：YT-H16982
英文簡稱：TL1A elisa試劑盒
定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)elisa檢測試劑盒的濃度。
購買試劑盒，提供免費代測服務(wù)
使用試劑盒前，必須仔細閱讀本說明書。
人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)elisa檢測試劑盒實驗原理 ：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。在預包被抗人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)抗體（固相抗體）的微孔酶標板中，加入人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)校準品和待測樣本，再加入另一株 HRP 標記的抗人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)抗體（酶標抗體），經(jīng)過溫育與充分洗滌，去除未結(jié)合的組分，在微孔板固 相表面形成固相抗體-抗原-酶標抗體的夾心復合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下，產(chǎn) 生藍色產(chǎn)物，在終止液（2M 硫酸）作用下，最終轉(zhuǎn)化為黃色，在酶標儀 450nm 波長上測定吸 光度（OD 值），吸光度（OD 值）與待測樣品中人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)的濃 度正相關(guān)。擬合校準品曲線，可以計算出樣本中人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)的 濃度
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細胞培養(yǎng)上清：4000rpm 條件下離心 20min，去除細胞顆粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反復凍融。
2、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，4000rpm 條件下離心 20min，小心地分離出血清，保存在-20℃以下，避免反復凍融。
3、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下，離心 20 分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復凍融。樣本收集后，無法一次檢測完畢，請按一次用量分裝凍存，避免反復凍融，使用時在室溫下解凍，確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿：用預冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比，比如 1g 的組織樣品對應 9 mL的 PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中，在冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎或反復凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘，取上清檢測。
5、細胞提取液：貼壁細胞用冷的 PBS 輕輕清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g 離心 5 分鐘后收集細胞；懸浮細 胞可直接離心收集。收集的細胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復凍融使細胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘，取上清檢測。
6、其他生物體液：1000×g 離心 20 分鐘，除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
洗板方法
1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。
2. 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作程序：
所有試劑和組分都先恢復到室溫，標準品、質(zhì)控品和樣品，建議做復孔。
1、按前面說明書描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設(shè)置標準品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL，0 值孔加樣本稀釋液 50μL，空白孔不加，樣本孔加待測樣本 50μL。
3、除空白孔外，標準品孔、0 值孔和樣本孔，加入辣根化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 20S，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復 5 次。若使用自動洗板機，請按洗板機操作程序進行洗板，添加浸泡30s 的程序，可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合，所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL，在酶標儀上讀取各孔吸光度（OD 值）。
試劑盒限制性：
1、僅供科研使用，不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標示的有效期內(nèi)使用，過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。
5、如果樣本值高于標準品濃度值，請將樣本適當稀釋后，再重新測定
6、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結(jié)果，檢測前，請排除該因素。
7、通過其他方法得到的檢測結(jié)果，與本試劑盒測定結(jié)果不具有直接的可比性
操作注意事項：
1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3. 濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍，最終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
免責聲明 1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或小鼠體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。 2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
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貨號：YT-H16982
英文簡稱：TL1A elisa試劑盒
定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)elisa檢測試劑盒的濃度。
購買試劑盒，提供免費代測服務(wù)
使用試劑盒前，必須仔細閱讀本說明書。
人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)elisa檢測試劑盒實驗原理 ：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。在預包被抗人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)抗體（固相抗體）的微孔酶標板中，加入人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)校準品和待測樣本，再加入另一株 HRP 標記的抗人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)抗體（酶標抗體），經(jīng)過溫育與充分洗滌，去除未結(jié)合的組分，在微孔板固 相表面形成固相抗體-抗原-酶標抗體的夾心復合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下，產(chǎn) 生藍色產(chǎn)物，在終止液（2M 硫酸）作用下，最終轉(zhuǎn)化為黃色，在酶標儀 450nm 波長上測定吸 光度（OD 值），吸光度（OD 值）與待測樣品中人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)的濃 度正相關(guān)。擬合校準品曲線，可以計算出樣本中人壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)的 濃度
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細胞培養(yǎng)上清：4000rpm 條件下離心 20min，去除細胞顆粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反復凍融。
2、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，4000rpm 條件下離心 20min，小心地分離出血清，保存在-20℃以下，避免反復凍融。
3、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下，離心 20 分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復凍融。樣本收集后，無法一次檢測完畢，請按一次用量分裝凍存，避免反復凍融，使用時在室溫下解凍，確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿：用預冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比，比如 1g 的組織樣品對應 9 mL的 PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中，在冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎或反復凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘，取上清檢測。
5、細胞提取液：貼壁細胞用冷的 PBS 輕輕清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g 離心 5 分鐘后收集細胞；懸浮細 胞可直接離心收集。收集的細胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復凍融使細胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘，取上清檢測。
6、其他生物體液：1000×g 離心 20 分鐘，除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
洗板方法
1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。
2. 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作程序：
所有試劑和組分都先恢復到室溫，標準品、質(zhì)控品和樣品，建議做復孔。
1、按前面說明書描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設(shè)置標準品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL，0 值孔加樣本稀釋液 50μL，空白孔不加，樣本孔加待測樣本 50μL。
3、除空白孔外，標準品孔、0 值孔和樣本孔，加入辣根化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 20S，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復 5 次。若使用自動洗板機，請按洗板機操作程序進行洗板，添加浸泡30s 的程序，可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合，所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL，在酶標儀上讀取各孔吸光度（OD 值）。
試劑盒限制性：
1、僅供科研使用，不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標示的有效期內(nèi)使用，過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。
5、如果樣本值高于標準品濃度值，請將樣本適當稀釋后，再重新測定
6、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結(jié)果，檢測前，請排除該因素。
7、通過其他方法得到的檢測結(jié)果，與本試劑盒測定結(jié)果不具有直接的可比性
操作注意事項：
1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3. 濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍，最終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
免責聲明 1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或小鼠體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。 2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
相關(guān)產(chǎn)品：
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