大鼠Janus激酶3(JAK3)elisa試劑盒
- 品牌:越騰生物
- 產(chǎn)地:國產(chǎn)
- 型號:48T/96T
- 貨號:YT-R23001
- 價格: ¥1200/盒
- 發(fā)布日期: 2023-12-06
- 更新日期: 2024-12-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
保存條件 | 冷藏2-8°C |
品牌 | 越騰生物 |
貨號 | YT-R23001 |
用途 | 僅供科研使用,不得用于臨床診斷 |
檢測方法 | 雙抗體夾心法,間接法 |
保質(zhì)期 | 180天 |
適應(yīng)物種 | 人,大鼠,小鼠,猴,雞、羊等 |
檢測限 | 0.1 ng/ml |
數(shù)量 | 90 |
包裝規(guī)格 | 48T/96T |
標(biāo)記物 | HRP標(biāo)記 |
樣本 | 血清,血漿,細胞培養(yǎng)上清 |
應(yīng)用 | 科研實驗 |
是否進口 | 否 |
大鼠Janus激酶3(JAK3)elisa試劑盒
貨號:YT-R23001
英文簡稱:(JAK3)elisa試劑盒
定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中大鼠Janus激酶3(JAK3)elisa試劑盒的濃度。
購買試劑盒,提供免費代測服務(wù)
使用試劑盒前,必須仔細閱讀本說明書。
大鼠Janus激酶3(JAK3)elisa試劑盒實驗原理 :
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。在預(yù)包被抗大鼠Janus激酶3(JAK3)抗體(固相抗體)的微孔酶標(biāo)板中,加入大鼠Janus激酶3(JAK3)校準(zhǔn)品和待測樣本,再加入另一株 HRP 標(biāo)記的抗大鼠Janus激酶3(JAK3)抗體(酶標(biāo)抗體),經(jīng)過溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分,在微孔板固 相表面形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,產(chǎn) 生藍色產(chǎn)物,在終止液(2M 硫酸)作用下,最終轉(zhuǎn)化為黃色,在酶標(biāo)儀 450nm 波長上測定吸 光度(OD 值),吸光度(OD 值)與待測樣品中大鼠Janus激酶3(JAK3)的濃 度正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線,可以計算出樣本中大鼠Janus激酶3(JAK3)的 濃度
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細胞培養(yǎng)上清:4000rpm 條件下離心 20min,去除細胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。
2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,4000rpm 條件下離心 20min,小心地分離出血清,保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。
3、血漿:肝素,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下,離心 20 分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。樣本收集后,無法一次檢測完畢,請按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,使用時在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9 mL的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘,取上清檢測。
5、細胞提取液:貼壁細胞用冷的 PBS 輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 離心 5 分鐘后收集細胞;懸浮細 胞可直接離心收集。收集的細胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復(fù)凍融使細胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘,取上清檢測。
6、其他生物體液:1000×g 離心 20 分鐘,除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
自備物品:
1.酶標(biāo)儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
試劑盒限制性:
1、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結(jié)果,檢測前,請排除該因素。
2、通過其他方法得到的檢測結(jié)果,與本試劑盒測定結(jié)果不具有直接的可比性。
操作注意事項:
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
免責(zé)聲明 1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或小鼠體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負責(zé)。 2. 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。
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人脂質(zhì)運載蛋白1(LCN1)elisa試劑盒
貨號:YT-R23001
英文簡稱:(JAK3)elisa試劑盒
定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中大鼠Janus激酶3(JAK3)elisa試劑盒的濃度。
購買試劑盒,提供免費代測服務(wù)
使用試劑盒前,必須仔細閱讀本說明書。
大鼠Janus激酶3(JAK3)elisa試劑盒實驗原理 :
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。在預(yù)包被抗大鼠Janus激酶3(JAK3)抗體(固相抗體)的微孔酶標(biāo)板中,加入大鼠Janus激酶3(JAK3)校準(zhǔn)品和待測樣本,再加入另一株 HRP 標(biāo)記的抗大鼠Janus激酶3(JAK3)抗體(酶標(biāo)抗體),經(jīng)過溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分,在微孔板固 相表面形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,產(chǎn) 生藍色產(chǎn)物,在終止液(2M 硫酸)作用下,最終轉(zhuǎn)化為黃色,在酶標(biāo)儀 450nm 波長上測定吸 光度(OD 值),吸光度(OD 值)與待測樣品中大鼠Janus激酶3(JAK3)的濃 度正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線,可以計算出樣本中大鼠Janus激酶3(JAK3)的 濃度
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細胞培養(yǎng)上清:4000rpm 條件下離心 20min,去除細胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。
2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,4000rpm 條件下離心 20min,小心地分離出血清,保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。
3、血漿:肝素,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下,離心 20 分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。樣本收集后,無法一次檢測完畢,請按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,使用時在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9 mL的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘,取上清檢測。
5、細胞提取液:貼壁細胞用冷的 PBS 輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 離心 5 分鐘后收集細胞;懸浮細 胞可直接離心收集。收集的細胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復(fù)凍融使細胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘,取上清檢測。
6、其他生物體液:1000×g 離心 20 分鐘,除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
自備物品:
1.酶標(biāo)儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
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操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
試劑盒限制性:
1、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結(jié)果,檢測前,請排除該因素。
2、通過其他方法得到的檢測結(jié)果,與本試劑盒測定結(jié)果不具有直接的可比性。
操作注意事項:
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
免責(zé)聲明 1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或小鼠體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負責(zé)。 2. 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。
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