大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa試劑盒
- 品牌:越騰生物
- 產(chǎn)地:國產(chǎn)
- 型號:48T/96T
- 貨號:YT-R23435
- 價格: ¥1200/盒
- 發(fā)布日期: 2023-12-06
- 更新日期: 2024-12-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
保存條件 | 冷藏2-8°C |
品牌 | 越騰生物 |
貨號 | YT-R23435 |
用途 | 僅供科研使用,不得用于臨床診斷 |
檢測方法 | 雙抗體夾心法,競爭法 |
保質(zhì)期 | 180天 |
適應物種 | 人,大鼠,小鼠,猴,雞、羊等 |
檢測限 | 0.1 ng/ml |
數(shù)量 | 90 |
包裝規(guī)格 | 48T/96T |
標記物 | HRP標記 |
樣本 | 血清,血漿,組織勻漿 |
應用 | 科研實驗 |
是否進口 | 否 |
大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa試劑盒
貨號:YT-R23435
英文簡稱:(BACE1)elisa試劑盒
定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa試劑盒的濃度。
購買試劑盒,提供免費代測服務
使用試劑盒前,必須仔細閱讀本說明書。
大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa試劑盒實驗原理 :
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。在預包被抗大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)抗體(固相抗體)的微孔酶標板中,加入大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)校準品和待測樣本,再加入另一株 HRP 標記的抗大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)抗體(酶標抗體),經(jīng)過溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分,在微孔板固 相表面形成固相抗體-抗原-酶標抗體的夾心復合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,產(chǎn) 生藍色產(chǎn)物,在終止液(2M 硫酸)作用下,最終轉(zhuǎn)化為黃色,在酶標儀 450nm 波長上測定吸 光度(OD 值),吸光度(OD 值)與待測樣品中大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)的濃 度正相關。擬合校準品曲線,可以計算出樣本中大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)的 濃度
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細胞培養(yǎng)上清:4000rpm 條件下離心 20min,去除細胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復凍融。
2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,4000rpm 條件下離心 20min,小心地分離出血清,保存在-20℃以下,避免反復凍融。
3、血漿:肝素,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下,離心 20 分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復凍融。樣本收集后,無法一次檢測完畢,請按一次用量分裝凍存,避免反復凍融,使用時在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿:用預冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應 9 mL的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎或反復凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘,取上清檢測。
5、細胞提取液:貼壁細胞用冷的 PBS 輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 離心 5 分鐘后收集細胞;懸浮細 胞可直接離心收集。收集的細胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復凍融使細胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘,取上清檢測。
6、其他生物體液:1000×g 離心 20 分鐘,除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作程序:
所有試劑和組分都先恢復到室溫,標準品、質(zhì)控品和樣品,建議做復孔。
1、按前面說明書描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設置標準品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,0 值孔加樣本稀釋液 50μL,空白孔不加,樣本孔加待測樣本 50μL。
3、除空白孔外,標準品孔、0 值孔和樣本孔,加入辣根化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 20S,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復 5 次。若使用自動洗板機,請按洗板機操作程序進行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL,在酶標儀上讀取各孔吸光度(OD 值)。
產(chǎn)品特點
一、、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型。
操作注意事項:
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
免責聲明 1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或小鼠體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。 2. 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。
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定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa試劑盒的濃度。
購買試劑盒,提供免費代測服務
使用試劑盒前,必須仔細閱讀本說明書。
大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa試劑盒實驗原理 :
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。在預包被抗大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)抗體(固相抗體)的微孔酶標板中,加入大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)校準品和待測樣本,再加入另一株 HRP 標記的抗大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)抗體(酶標抗體),經(jīng)過溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分,在微孔板固 相表面形成固相抗體-抗原-酶標抗體的夾心復合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,產(chǎn) 生藍色產(chǎn)物,在終止液(2M 硫酸)作用下,最終轉(zhuǎn)化為黃色,在酶標儀 450nm 波長上測定吸 光度(OD 值),吸光度(OD 值)與待測樣品中大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)的濃 度正相關。擬合校準品曲線,可以計算出樣本中大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)的 濃度
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細胞培養(yǎng)上清:4000rpm 條件下離心 20min,去除細胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復凍融。
2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,4000rpm 條件下離心 20min,小心地分離出血清,保存在-20℃以下,避免反復凍融。
3、血漿:肝素,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下,離心 20 分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復凍融。樣本收集后,無法一次檢測完畢,請按一次用量分裝凍存,避免反復凍融,使用時在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿:用預冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應 9 mL的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎或反復凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘,取上清檢測。
5、細胞提取液:貼壁細胞用冷的 PBS 輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 離心 5 分鐘后收集細胞;懸浮細 胞可直接離心收集。收集的細胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復凍融使細胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘,取上清檢測。
6、其他生物體液:1000×g 離心 20 分鐘,除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
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1、按前面說明書描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設置標準品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,0 值孔加樣本稀釋液 50μL,空白孔不加,樣本孔加待測樣本 50μL。
3、除空白孔外,標準品孔、0 值孔和樣本孔,加入辣根化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 20S,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復 5 次。若使用自動洗板機,請按洗板機操作程序進行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL,在酶標儀上讀取各孔吸光度(OD 值)。
產(chǎn)品特點
一、、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型。
操作注意事項:
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
免責聲明 1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或小鼠體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。 2. 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。
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