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天津越騰生物技術(shù)有限公司
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大鼠γ-生育酚(γ-Tocopherol)elisa試劑盒
  • 品牌:越騰生物
  • 產(chǎn)地:國產(chǎn)
  • 型號:48T/96T
  • 貨號:YT-R23449
  • 價(jià)格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2023-12-06
  • 更新日期: 2024-12-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 國產(chǎn)
保存條件 冷藏2-8°C
品牌 越騰生物
貨號 YT-R23449
用途 僅供科研使用,不得用于臨床診斷
檢測方法 雙抗體夾心法,間接法
保質(zhì)期 180天
適應(yīng)物種 人,大鼠,小鼠,猴,雞、羊等
檢測限 0.1 ng/ml
數(shù)量 90
包裝規(guī)格 48T/96T
標(biāo)記物 HRP標(biāo)記
樣本 血清,血漿,組織勻漿
應(yīng)用 科研實(shí)驗(yàn)
是否進(jìn)口
大鼠γ-生育酚(γ-Tocopherol)elisa試劑盒
貨號:YT-R23449
英文簡稱:(γ-Tocopherol)elisa試劑盒

定量檢測血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中大鼠γ-生育酚(γ-Tocopherol)elisa試劑盒的濃度。
購買試劑盒,提供免費(fèi)代測服務(wù)
使用試劑盒前,必須仔細(xì)閱讀本說明書。 

大鼠γ-生育酚(γ-Tocopherol)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 :
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。在預(yù)包被抗大鼠γ-生育酚(γ-Tocopherol)抗體(固相抗體)的微孔酶標(biāo)板中,加入大鼠γ-生育酚(γ-Tocopherol)校準(zhǔn)品和待測樣本,再加入另一株 HRP 標(biāo)記的抗大鼠γ-生育酚(γ-Tocopherol)抗體(酶標(biāo)抗體),經(jīng)過溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分,在微孔板固 相表面形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,產(chǎn) 生藍(lán)色產(chǎn)物,在終止液(2M 硫酸)作用下,最終轉(zhuǎn)化為黃色,在酶標(biāo)儀 450nm 波長上測定吸 光度(OD 值),吸光度(OD 值)與待測樣品中大鼠γ-生育酚(γ-Tocopherol)的濃 度正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線,可以計(jì)算出樣本中大鼠γ-生育酚(γ-Tocopherol)的 濃度


樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細(xì)胞培養(yǎng)上清:4000rpm 條件下離心 20min,去除細(xì)胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。
2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,4000rpm 條件下離心 20min,小心地分離出血清,保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。
3、血漿:肝素,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下,離心 20 分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。樣本收集后,無法一次檢測完畢,請按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,使用時(shí)在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9 mL的 PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘,取上清檢測。
5、細(xì)胞提取液:貼壁細(xì)胞用冷的 PBS 輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 離心 5 分鐘后收集細(xì)胞;懸浮細(xì) 胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細(xì)胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復(fù)凍融使細(xì)胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘,取上清檢測。
6、其他生物體液:1000×g 離心 20 分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。

其他用品
1、酶標(biāo)儀(450nm)
2、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4、洗瓶或者自動洗板機(jī)
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml 量筒

操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。


試劑盒限制性:
1、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。
2、如果樣本值高于標(biāo)準(zhǔn)品濃度值,請將樣本適當(dāng)稀釋后,再重新測定。
操作注意事項(xiàng):
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
免責(zé)聲明 1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或小鼠體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。 2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
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