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天津越騰生物技術(shù)有限公司
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大鼠艾蒿特異性IgG-FAB(AIgG-FAB)elisa試劑盒
  • 品牌:越騰生物
  • 產(chǎn)地:國(guó)產(chǎn)
  • 型號(hào):48T/96T
  • 貨號(hào):YT-R23493
  • 價(jià)格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2023-12-06
  • 更新日期: 2024-12-18
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn)
保存條件 冷藏2-8°C
品牌 越騰生物
貨號(hào) YT-R23493
用途 僅供科研使用,不得用于臨床診斷
檢測(cè)方法 雙抗體夾心法,競(jìng)爭(zhēng)法
保質(zhì)期 6個(gè)月
適應(yīng)物種 人,大鼠,小鼠,猴,雞、羊等
檢測(cè)限 0.1 ng/ml
數(shù)量 90
包裝規(guī)格 48T/96T
標(biāo)記物 HRP標(biāo)記
樣本
應(yīng)用 科研實(shí)驗(yàn)
是否進(jìn)口
大鼠艾蒿特IgG-FAB(AIgG-FAB)elisa試劑盒
貨號(hào):YT-R23493
英文簡(jiǎn)稱:(AIgG-FAB)elisa試劑盒

使用目的:

本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中大鼠艾蒿特IgG-FAB(AIgG-FAB)含量。。

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使用試劑盒前,必須仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。 

大鼠艾蒿特IgG-FAB(AIgG-FAB)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 :

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本大鼠艾蒿特IgG-FAB(AIgG-FAB)水平。用純化的大鼠艾蒿特IgG-FAB(AIgG-FAB)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大鼠艾蒿特IgG-FAB(AIgG-FAB),再與HRP標(biāo)記的大鼠艾蒿特IgG-FAB(AIgG-FAB)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)洗滌后底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠艾蒿特IgG-FAB(AIgG-FAB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品大鼠艾蒿特IgG-FAB(AIgG-FAB)濃度。

樣品的采集和儲(chǔ)存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過(guò)程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細(xì)胞培養(yǎng)上清:4000rpm 條件下離心 20min,去除細(xì)胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。
2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,4000rpm 條件下離心 20min,小心地分離出血清,保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。
3、血漿:肝素,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下,離心 20 分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。樣本收集后,無(wú)法一次檢測(cè)完畢,請(qǐng)按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,使用時(shí)在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對(duì)應(yīng) 9 mL的 PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘,取上清檢測(cè)。
5、細(xì)胞提取液:貼壁細(xì)胞用冷的 PBS 輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 離心 5 分鐘后收集細(xì)胞;懸浮細(xì) 胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個(gè)細(xì)胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過(guò)反復(fù)凍融使細(xì)胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘,取上清檢測(cè)。
6、其他生物體液:1000×g 離心 20 分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測(cè)。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作程序:
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。
1、按前面說(shuō)明書(shū)描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,0 值孔加樣本稀釋液 50μL,空白孔不加,樣本孔加待測(cè)樣本 50μL。
3、除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔、0 值孔和樣本孔,加入辣根化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開(kāi)封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 20S,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù) 5 次。若使用自動(dòng)洗板機(jī),請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL,在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度(OD 值)。

試劑盒限制性:
1、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。
2、如果樣本值高于標(biāo)準(zhǔn)品濃度值,請(qǐng)將樣本適當(dāng)稀釋后,再重新測(cè)定。
免責(zé)聲明 1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或小鼠體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。 2. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
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