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植物分支酸變位酶(CM)ELISA試劑盒
- 品牌：越騰生物
- 產(chǎn)地：國產(chǎn)
- 型號：48T/96T
- 貨號：YT-P0311
- 價格： ￥1200/盒
- 發(fā)布日期： 2023-12-13
- 更新日期： 2024-12-18
產(chǎn)品詳請
| 產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
| 保存條件 | 冷藏2-8°C |
| 品牌 | 越騰生物 |
| 貨號 | YT-P0311 |
| 用途 | 僅供科研使用,不得用于臨床診斷 |
| 檢測方法 | 雙抗體夾心法,間接法 |
| 保質(zhì)期 | 6個月 |
| 適應(yīng)物種 | 人,大鼠,小鼠,猴,雞、羊等 |
| 檢測限 | 0.1 ng/ml |
| 數(shù)量 | 90 |
| 包裝規(guī)格 | 48T/96T |
| 標記物 | HRP標記 |
| 樣本 | 血清,血漿,細胞培養(yǎng)上清 |
| 應(yīng)用 | 科研實驗 |
| 是否進口 | 否 |
植物分支酸變位酶(CM)ELISA試劑盒
貨號：YT-P0311
英文簡稱：(CM)ELISA試劑盒
定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中植物分支酸變位酶(CM)ELISA試劑盒的濃度。
購買試劑盒，提供免費代測服務(wù)
操作程序：
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫，標準品、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔。
1、按前面說明書描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設(shè)置標準品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL，0 值孔加樣本稀釋液 50μL，空白孔不加，樣本孔加待測樣本 50μL。
3、除空白孔外，標準品孔、0 值孔和樣本孔，加入辣根化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 20S，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù) 5 次。若使用自動洗板機，請按洗板機操作程序進行洗板，添加浸泡30s 的程序，可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合，所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL，在酶標儀上讀取各孔吸光度（OD 值）。
試劑盒限制性：
1、僅供科研使用，不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標示的有效期內(nèi)使用，過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
其他用品
1、酶標儀（450nm）
2、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4、洗瓶或者自動洗板機
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml 量筒
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細胞培養(yǎng)上清：4000rpm 條件下離心 20min，去除細胞顆粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反復(fù)凍融。
2、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，4000rpm 條件下離心 20min，小心地分離出血清，保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。
3、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下，離心 20 分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。樣本收集后，無法一次檢測完畢，請按一次用量分裝凍存，避免反復(fù)凍融，使用時在室溫下解凍，確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿：用預(yù)冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比，比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9 mL的 PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中，在冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘，取上清檢測。
5、細胞提取液：貼壁細胞用冷的 PBS 輕輕清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g 離心 5 分鐘后收集細胞；懸浮細 胞可直接離心收集。收集的細胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復(fù)凍融使細胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘，取上清檢測。
6、其他生物體液：1000×g 離心 20 分鐘，除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
操作步驟：
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3. 樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
技術(shù)提示：
1、混合蛋白溶液時，避免起泡。
2、加校準品與樣本時，每個校準品濃度和樣本都要更換移液槍頭，公共組分應(yīng)該懸臂加樣，避免交叉污染。
3、合適的溫育時間，和充分的洗滌步驟，是保證實驗結(jié)果準確性的必要條件。
4、使用自動洗板機時，加入一個 30 秒浸泡的步驟，可以提高檢測精度。
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免責(zé)聲明 1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或小鼠體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔(dān)，本公司概不負責(zé)。 2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔(dān)。
貨號：YT-P0311
英文簡稱：(CM)ELISA試劑盒
定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中植物分支酸變位酶(CM)ELISA試劑盒的濃度。
購買試劑盒，提供免費代測服務(wù)
操作程序：
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫，標準品、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔。
1、按前面說明書描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設(shè)置標準品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL，0 值孔加樣本稀釋液 50μL，空白孔不加，樣本孔加待測樣本 50μL。
3、除空白孔外，標準品孔、0 值孔和樣本孔，加入辣根化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 20S，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù) 5 次。若使用自動洗板機，請按洗板機操作程序進行洗板，添加浸泡30s 的程序，可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合，所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL，在酶標儀上讀取各孔吸光度（OD 值）。
試劑盒限制性：
1、僅供科研使用，不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標示的有效期內(nèi)使用，過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
其他用品
1、酶標儀（450nm）
2、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4、洗瓶或者自動洗板機
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml 量筒
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細胞培養(yǎng)上清：4000rpm 條件下離心 20min，去除細胞顆粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反復(fù)凍融。
2、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，4000rpm 條件下離心 20min，小心地分離出血清，保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。
3、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下，離心 20 分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。樣本收集后，無法一次檢測完畢，請按一次用量分裝凍存，避免反復(fù)凍融，使用時在室溫下解凍，確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿：用預(yù)冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比，比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9 mL的 PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中，在冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘，取上清檢測。
5、細胞提取液：貼壁細胞用冷的 PBS 輕輕清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g 離心 5 分鐘后收集細胞；懸浮細 胞可直接離心收集。收集的細胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復(fù)凍融使細胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘，取上清檢測。
6、其他生物體液：1000×g 離心 20 分鐘，除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
操作步驟：
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3. 樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
技術(shù)提示：
1、混合蛋白溶液時，避免起泡。
2、加校準品與樣本時，每個校準品濃度和樣本都要更換移液槍頭，公共組分應(yīng)該懸臂加樣，避免交叉污染。
3、合適的溫育時間，和充分的洗滌步驟，是保證實驗結(jié)果準確性的必要條件。
4、使用自動洗板機時，加入一個 30 秒浸泡的步驟，可以提高檢測精度。
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