植物磷脂酶C(PLC)ELISA試劑盒
- 品牌:越騰生物
- 產(chǎn)地:國產(chǎn)
- 型號:48T/96T
- 貨號:YT-P0334
- 價格: ¥1200/盒
- 發(fā)布日期: 2023-12-13
- 更新日期: 2024-12-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
保存條件 | 冷藏2-8°C |
品牌 | 越騰生物 |
貨號 | YT-P0334 |
用途 | 僅供科研使用,不得用于臨床診斷 |
檢測方法 | 雙抗體夾心法,競爭法 |
保質(zhì)期 | 6個月 |
適應(yīng)物種 | 人,大鼠,小鼠,猴,雞、羊等 |
檢測限 | 0.1 ng/ml |
數(shù)量 | 90 |
包裝規(guī)格 | 48T/96T |
標(biāo)記物 | HRP標(biāo)記 |
樣本 | 血清,血漿,組織勻漿 |
應(yīng)用 | 科研實(shí)驗(yàn) |
是否進(jìn)口 | 否 |
植物磷脂酶C(PLC)ELISA試劑盒
貨號:YT-P0334
英文簡稱:(PLC)ELISA試劑盒
定量檢測血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中植物磷脂酶C(PLC)ELISA試劑盒的濃度。
購買試劑盒,提供免費(fèi)代測服務(wù)
使用試劑盒前,必須仔細(xì)閱讀本說明書。
植物磷脂酶C(PLC)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 :
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。在預(yù)包被抗植物磷脂酶C(PLC)抗體(固相抗體)的微孔酶標(biāo)板中,加入植物磷脂酶C(PLC)校準(zhǔn)品和待測樣本,再加入另一株 HRP 標(biāo)記的抗植物磷脂酶C(PLC)抗體(酶標(biāo)抗體),經(jīng)過溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分,在微孔板固 相表面形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,產(chǎn) 生藍(lán)色產(chǎn)物,在終止液(2M 硫酸)作用下,最終轉(zhuǎn)化為黃色,在酶標(biāo)儀 450nm 波長上測定吸 光度(OD 值),吸光度(OD 值)與待測樣品中植物磷脂酶C(PLC)的濃 度正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線,可以計(jì)算出樣本中植物磷脂酶C(PLC)的 濃度
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細(xì)胞培養(yǎng)上清:4000rpm 條件下離心 20min,去除細(xì)胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。
2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,4000rpm 條件下離心 20min,小心地分離出血清,保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。
3、血漿:肝素,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下,離心 20 分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。樣本收集后,無法一次檢測完畢,請按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,使用時在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9 mL的 PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘,取上清檢測。
5、細(xì)胞提取液:貼壁細(xì)胞用冷的 PBS 輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 離心 5 分鐘后收集細(xì)胞;懸浮細(xì) 胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細(xì)胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復(fù)凍融使細(xì)胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘,取上清檢測。
6、其他生物體液:1000×g 離心 20 分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。
自備物品:
1.酶標(biāo)儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
操作程序:
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。
1、按前面說明書描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,0 值孔加樣本稀釋液 50μL,空白孔不加,樣本孔加待測樣本 50μL。
3、除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔、0 值孔和樣本孔,加入辣根化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 20S,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù) 5 次。若使用自動洗板機(jī),請按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL,在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度(OD 值)。
試劑盒限制性:
1、僅供科研使用,不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用,過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
操作注意事項(xiàng):
1. 濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
2. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
3. 所有液體組分使用前充分搖勻。
免責(zé)聲明 1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或小鼠體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。 2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
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人亞鐵螯合酶(FECH)elisa試劑盒
貨號:YT-P0334
英文簡稱:(PLC)ELISA試劑盒
定量檢測血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中植物磷脂酶C(PLC)ELISA試劑盒的濃度。
購買試劑盒,提供免費(fèi)代測服務(wù)
使用試劑盒前,必須仔細(xì)閱讀本說明書。
植物磷脂酶C(PLC)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 :
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。在預(yù)包被抗植物磷脂酶C(PLC)抗體(固相抗體)的微孔酶標(biāo)板中,加入植物磷脂酶C(PLC)校準(zhǔn)品和待測樣本,再加入另一株 HRP 標(biāo)記的抗植物磷脂酶C(PLC)抗體(酶標(biāo)抗體),經(jīng)過溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分,在微孔板固 相表面形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,產(chǎn) 生藍(lán)色產(chǎn)物,在終止液(2M 硫酸)作用下,最終轉(zhuǎn)化為黃色,在酶標(biāo)儀 450nm 波長上測定吸 光度(OD 值),吸光度(OD 值)與待測樣品中植物磷脂酶C(PLC)的濃 度正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線,可以計(jì)算出樣本中植物磷脂酶C(PLC)的 濃度
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細(xì)胞培養(yǎng)上清:4000rpm 條件下離心 20min,去除細(xì)胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。
2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,4000rpm 條件下離心 20min,小心地分離出血清,保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。
3、血漿:肝素,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下,離心 20 分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。樣本收集后,無法一次檢測完畢,請按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,使用時在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9 mL的 PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘,取上清檢測。
5、細(xì)胞提取液:貼壁細(xì)胞用冷的 PBS 輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 離心 5 分鐘后收集細(xì)胞;懸浮細(xì) 胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細(xì)胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復(fù)凍融使細(xì)胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘,取上清檢測。
6、其他生物體液:1000×g 離心 20 分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。
自備物品:
1.酶標(biāo)儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
操作程序:
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。
1、按前面說明書描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,0 值孔加樣本稀釋液 50μL,空白孔不加,樣本孔加待測樣本 50μL。
3、除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔、0 值孔和樣本孔,加入辣根化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 20S,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù) 5 次。若使用自動洗板機(jī),請按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL,在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度(OD 值)。
試劑盒限制性:
1、僅供科研使用,不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用,過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
操作注意事項(xiàng):
1. 濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
2. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
3. 所有液體組分使用前充分搖勻。
免責(zé)聲明 1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或小鼠體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。 2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
相關(guān)產(chǎn)品:
人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)elisa試劑盒
人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)elisa試劑盒
人脂蛋白α(Lp-α)elisa試劑盒
人三價砷轉(zhuǎn)移酶(AS3MT)elisa試劑盒
人亞鐵螯合酶(FECH)elisa試劑盒
植物磷脂酶B(PLB)ELISA試劑盒