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- 品牌：越騰生物
- 產(chǎn)地：國產(chǎn)
- 型號：48T/96T
- 貨號：YT-P0382
- 價格： ￥1200/盒
- 發(fā)布日期： 2023-12-13
- 更新日期： 2024-12-18
| 產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
| 保存條件 | 冷藏2-8°C |
| 品牌 | 越騰生物 |
| 貨號 | YT-P0382 |
| 用途 | 僅供科研使用,不得用于臨床診斷 |
| 檢測方法 | 雙抗體夾心法,間接法 |
| 保質(zhì)期 | 180天 |
| 適應物種 | 人,大鼠,小鼠,猴,雞、羊等 |
| 檢測限 | 0.1 ng/ml |
| 數(shù)量 | 90 |
| 包裝規(guī)格 | 48T/96T |
| 標記物 | HRP標記 |
| 樣本 | |
| 應用 | 科研實驗 |
| 是否進口 | 否 |
貨號：YT-P0382
英文簡稱：(ACS)ELISA試劑盒
使用目的：
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中植物酯酰輔酶A合成酶(ACS)含量。。
購買試劑盒，提供免費代測服務使用試劑盒前，必須仔細閱讀本說明書。
植物酯酰輔酶A合成酶(ACS)ELISA試劑盒實驗原理 ：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中植物酯酰輔酶A合成酶(ACS)水平。用純化的植物酯酰輔酶A合成酶(ACS)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入植物酯酰輔酶A合成酶(ACS)，再與HRP標記的植物酯酰輔酶A合成酶(ACS)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物酯酰輔酶A合成酶(ACS)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中植物酯酰輔酶A合成酶(ACS)濃度。
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細胞培養(yǎng)上清：4000rpm 條件下離心 20min，去除細胞顆粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反復凍融。
2、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，4000rpm 條件下離心 20min，小心地分離出血清，保存在-20℃以下，避免反復凍融。
3、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下，離心 20 分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復凍融。樣本收集后，無法一次檢測完畢，請按一次用量分裝凍存，避免反復凍融，使用時在室溫下解凍，確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿：用預冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比，比如 1g 的組織樣品對應 9 mL的 PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中，在冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎或反復凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘，取上清檢測。
5、細胞提取液：貼壁細胞用冷的 PBS 輕輕清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g 離心 5 分鐘后收集細胞；懸浮細 胞可直接離心收集。收集的細胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復凍融使細胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘，取上清檢測。
6、其他生物體液：1000×g 離心 20 分鐘，除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
自備物品：
1.酶標儀（450nm）
2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
操作程序：
所有試劑和組分都先恢復到室溫，標準品、質(zhì)控品和樣品，建議做復孔。
1、按前面說明書描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設置標準品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL，0 值孔加樣本稀釋液 50μL，空白孔不加，樣本孔加待測樣本 50μL。
3、除空白孔外，標準品孔、0 值孔和樣本孔，加入辣根化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 20S，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復 5 次。若使用自動洗板機，請按洗板機操作程序進行洗板，添加浸泡30s 的程序，可以提高檢測的精度。洗板結束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合，所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL，在酶標儀上讀取各孔吸光度（OD 值）。
產(chǎn)品特點
一、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
二、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型
免責聲明
1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或小鼠體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。
2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
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