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天津越騰生物技術(shù)有限公司
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植物葉綠素B還原酶(CBR)ELISA試劑盒
  • 品牌:越騰生物
  • 產(chǎn)地:國產(chǎn)
  • 型號:48T/96T
  • 貨號:YT-P0393
  • 價格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2023-12-13
  • 更新日期: 2024-12-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 國產(chǎn)
保存條件 冷藏2-8°C
品牌 越騰生物
貨號 YT-P0393
用途 僅供科研使用,不得用于臨床診斷
檢測方法 雙抗體夾心法,間接法
保質(zhì)期 6個月
適應(yīng)物種 人,大鼠,小鼠,猴,雞、羊等
檢測限 0.1 ng/ml
數(shù)量 90
包裝規(guī)格 48T/96T
標(biāo)記物 HRP標(biāo)記
樣本 血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清
應(yīng)用 科研實驗
是否進(jìn)口
植物葉綠素B還原酶(CBR)ELISA試劑盒
貨號:YT-P0393
英文簡稱:(CBR)ELISA試劑盒

定量檢測血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中植物葉綠素B還原酶(CBR)ELISA試劑盒的濃度。
購買試劑盒,提供免費(fèi)代測服務(wù)
操作程序:
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。
1、按前面說明書描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,0 值孔加樣本稀釋液 50μL,空白孔不加,樣本孔加待測樣本 50μL。
3、除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔、0 值孔和樣本孔,加入辣根化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 20S,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù) 5 次。若使用自動洗板機(jī),請按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL,在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度(OD 值)。

試劑盒限制性:
1、僅供科研使用,不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用,過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。


洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。


技術(shù)提示:
1、混合蛋白溶液時,避免起泡。
2、加校準(zhǔn)品與樣本時,每個校準(zhǔn)品濃度和樣本都要更換移液槍頭,公共組分應(yīng)該懸臂加樣,避免交叉污染。
3、合適的溫育時間,和充分的洗滌步驟,是保證實驗結(jié)果準(zhǔn)確性的必要條件。
4、使用自動洗板機(jī)時,加入一個 30 秒浸泡的步驟,可以提高檢測精度。
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免責(zé)聲明 1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或小鼠體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。 2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。

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