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植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)ELISA試劑盒
- 品牌：越騰生物
- 產(chǎn)地：國產(chǎn)
- 型號(hào)：48T/96T
- 貨號(hào)：YT-P0397
- 價(jià)格： ￥1200/盒
- 發(fā)布日期： 2023-12-13
- 更新日期： 2024-12-18
產(chǎn)品詳請(qǐng)
| 產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
| 保存條件 | 冷藏2-8°C |
| 品牌 | 越騰生物 |
| 貨號(hào) | YT-P0397 |
| 用途 | 僅供科研使用,不得用于臨床診斷 |
| 檢測(cè)方法 | 雙抗體夾心法,競爭法 |
| 保質(zhì)期 | 180天 |
| 適應(yīng)物種 | 人,大鼠,小鼠,猴,雞、羊等 |
| 檢測(cè)限 | 0.1 ng/ml |
| 數(shù)量 | 90 |
| 包裝規(guī)格 | 48T/96T |
| 標(biāo)記物 | HRP標(biāo)記 |
| 樣本 | 血清,血漿,組織勻漿 |
| 應(yīng)用 | 科研實(shí)驗(yàn) |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)ELISA試劑盒
貨號(hào)：YT-P0397
英文簡稱：(PP2A)ELISA試劑盒
定量檢測(cè)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)ELISA試劑盒的濃度。
購買試劑盒，提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)
使用試劑盒前，必須仔細(xì)閱讀本說明書。
植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 ：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。在預(yù)包被抗植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)抗體（固相抗體）的微孔酶標(biāo)板中，加入植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)校準(zhǔn)品和待測(cè)樣本，再加入另一株 HRP 標(biāo)記的抗植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)抗體（酶標(biāo)抗體），經(jīng)過溫育與充分洗滌，去除未結(jié)合的組分，在微孔板固 相表面形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下，產(chǎn) 生藍(lán)色產(chǎn)物，在終止液（2M 硫酸）作用下，最終轉(zhuǎn)化為黃色，在酶標(biāo)儀 450nm 波長上測(cè)定吸 光度（OD 值），吸光度（OD 值）與待測(cè)樣品中植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)的濃 度正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線，可以計(jì)算出樣本中植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)的 濃度
樣品的采集和儲(chǔ)存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細(xì)胞培養(yǎng)上清：4000rpm 條件下離心 20min，去除細(xì)胞顆粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反復(fù)凍融。
2、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，4000rpm 條件下離心 20min，小心地分離出血清，保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。
3、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下，離心 20 分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。樣本收集后，無法一次檢測(cè)完畢，請(qǐng)按一次用量分裝凍存，避免反復(fù)凍融，使用時(shí)在室溫下解凍，確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿：用預(yù)冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比，比如 1g 的組織樣品對(duì)應(yīng) 9 mL的 PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中，在冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘，取上清檢測(cè)。
5、細(xì)胞提取液：貼壁細(xì)胞用冷的 PBS 輕輕清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g 離心 5 分鐘后收集細(xì)胞；懸浮細(xì) 胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個(gè)細(xì)胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復(fù)凍融使細(xì)胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘，取上清檢測(cè)。
6、其他生物體液：1000×g 離心 20 分鐘，除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測(cè)。
其他用品
1、酶標(biāo)儀（450nm）
2、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml 量筒
操作程序：
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫，標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔。
1、按前面說明書描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL，0 值孔加樣本稀釋液 50μL，空白孔不加，樣本孔加待測(cè)樣本 50μL。
3、除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔、0 值孔和樣本孔，加入辣根化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 20S，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù) 5 次。若使用自動(dòng)洗板機(jī)，請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡30s 的程序，可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合，所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL，在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度（OD 值）。
試劑盒限制性：
1、僅供科研使用，不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用，過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。
5、如果樣本值高于標(biāo)準(zhǔn)品濃度值，請(qǐng)將樣本適當(dāng)稀釋后，再重新測(cè)定
6、待測(cè)樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果，檢測(cè)前，請(qǐng)排除該因素。
7、通過其他方法得到的檢測(cè)結(jié)果，與本試劑盒測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性
操作注意事項(xiàng)：
1. 濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白；按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍，最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
2. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
3. 所有液體組分使用前充分搖勻。
免責(zé)聲明 1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或小鼠體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé)。 2. 嚴(yán)格按照說明書操作，實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
相關(guān)產(chǎn)品：
人孕/孕酮(PROG)elisa試劑盒
人促甲狀腺素(TSH)elisa試劑盒
人三價(jià)砷轉(zhuǎn)移酶(AS3MT)elisa試劑盒
人亞鐵螯合酶(FECH)elisa試劑盒
貨號(hào)：YT-P0397
英文簡稱：(PP2A)ELISA試劑盒
定量檢測(cè)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)ELISA試劑盒的濃度。
購買試劑盒，提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)
使用試劑盒前，必須仔細(xì)閱讀本說明書。
植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 ：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。在預(yù)包被抗植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)抗體（固相抗體）的微孔酶標(biāo)板中，加入植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)校準(zhǔn)品和待測(cè)樣本，再加入另一株 HRP 標(biāo)記的抗植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)抗體（酶標(biāo)抗體），經(jīng)過溫育與充分洗滌，去除未結(jié)合的組分，在微孔板固 相表面形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下，產(chǎn) 生藍(lán)色產(chǎn)物，在終止液（2M 硫酸）作用下，最終轉(zhuǎn)化為黃色，在酶標(biāo)儀 450nm 波長上測(cè)定吸 光度（OD 值），吸光度（OD 值）與待測(cè)樣品中植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)的濃 度正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線，可以計(jì)算出樣本中植物蛋白磷酸脂酶(PP2A)的 濃度
樣品的采集和儲(chǔ)存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細(xì)胞培養(yǎng)上清：4000rpm 條件下離心 20min，去除細(xì)胞顆粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反復(fù)凍融。
2、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，4000rpm 條件下離心 20min，小心地分離出血清，保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。
3、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下，離心 20 分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。樣本收集后，無法一次檢測(cè)完畢，請(qǐng)按一次用量分裝凍存，避免反復(fù)凍融，使用時(shí)在室溫下解凍，確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿：用預(yù)冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比，比如 1g 的組織樣品對(duì)應(yīng) 9 mL的 PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中，在冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘，取上清檢測(cè)。
5、細(xì)胞提取液：貼壁細(xì)胞用冷的 PBS 輕輕清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g 離心 5 分鐘后收集細(xì)胞；懸浮細(xì) 胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個(gè)細(xì)胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復(fù)凍融使細(xì)胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘，取上清檢測(cè)。
6、其他生物體液：1000×g 離心 20 分鐘，除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測(cè)。
其他用品
1、酶標(biāo)儀（450nm）
2、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml 量筒
操作程序：
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫，標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔。
1、按前面說明書描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL，0 值孔加樣本稀釋液 50μL，空白孔不加，樣本孔加待測(cè)樣本 50μL。
3、除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔、0 值孔和樣本孔，加入辣根化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 20S，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù) 5 次。若使用自動(dòng)洗板機(jī)，請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡30s 的程序，可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合，所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL，在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度（OD 值）。
試劑盒限制性：
1、僅供科研使用，不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用，過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。
5、如果樣本值高于標(biāo)準(zhǔn)品濃度值，請(qǐng)將樣本適當(dāng)稀釋后，再重新測(cè)定
6、待測(cè)樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果，檢測(cè)前，請(qǐng)排除該因素。
7、通過其他方法得到的檢測(cè)結(jié)果，與本試劑盒測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性
操作注意事項(xiàng)：
1. 濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白；按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍，最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
2. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
3. 所有液體組分使用前充分搖勻。
免責(zé)聲明 1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或小鼠體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé)。 2. 嚴(yán)格按照說明書操作，實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
相關(guān)產(chǎn)品：
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