高靈敏性植物磷酸二酯酶(PDE)ELISA試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng),全國(guó)包郵,可免費(fèi)代測(cè),訂購(gòu)詳詢

產(chǎn)品：植物磷酸二酯酶(PDE)ELISA試劑盒

貨號(hào)：YT-P0320
品牌：越騰生物
包裝規(guī)格：48T/96T
用途：僅供科研使用,不得用于臨床診斷
產(chǎn)地：國(guó)產(chǎn)
標(biāo)記物：HRP標(biāo)記
檢測(cè)方法：雙抗體夾心法,競(jìng)爭(zhēng)法
檢測(cè)限：0.1 ng/ml
保質(zhì)期：6個(gè)月
保存條件：冷藏2-8°C
適應(yīng)物種：人,大鼠,小鼠,猴,雞、羊等。
植物磷酸二酯酶(PDE)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 ：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。在預(yù)包被抗植物磷酸二酯酶(PDE)抗體（固相抗體）的微孔酶標(biāo)板中，加入植物磷酸二酯酶(PDE)校準(zhǔn)品和待測(cè)樣本，再加入另一株 HRP 標(biāo)記的抗植物磷酸二酯酶(PDE)抗體（酶標(biāo)抗體），經(jīng)過(guò)溫育與充分洗滌，去除未結(jié)合的組分，在微孔板固 相表面形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下，產(chǎn) 生藍(lán)色產(chǎn)物，在終止液（2M 硫酸）作用下，最終轉(zhuǎn)化為黃色，在酶標(biāo)儀 450nm 波長(zhǎng)上測(cè)定吸 光度（OD 值），吸光度（OD 值）與待測(cè)樣品中植物磷酸二酯酶(PDE)的濃 度正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線，可以計(jì)算出樣本中植物磷酸二酯酶(PDE)的 濃度。
樣品收集、處理及保存方法：
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
操作步驟：
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
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使用試劑盒前，必須仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。