本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。在預包被抗小鼠骨鈣素（BGP;OCN）抗體（固相抗體）的微孔酶標板中，加入小鼠骨鈣素（BGP;OCN）校準品和待測樣本，再加入另一株 HRP 標記的抗小鼠骨鈣素（BGP;OCN）抗體（酶標抗體），經(jīng)過溫育與充分洗滌，去除未結合的組分，在微孔板固 相表面形成固相抗體-抗原-酶標抗體的夾心復合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下，產(chǎn) 生藍色產(chǎn)物，在終止液（2M 硫酸）作用下，最終轉化為黃色，在酶標儀 450nm 波長上測定吸 光度（OD 值），吸光度（OD 值）與待測樣品中小鼠骨鈣素（BGP;OCN）的濃 度正相關。擬合校準品曲線，可以計算出樣本中小鼠骨鈣素（BGP;OCN）的 濃度。

操作步驟：
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3. 樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
試劑盒限制性：
1、僅供科研使用，不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標示的有效期內(nèi)使用，過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
操作注意事項：
1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3. 濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍，最終結果乘以5才是樣本實際濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
免責聲明 1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或小鼠體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。 2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
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